人细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物液体中的DDC含量，适用于科研用途，不可用于临床诊断。

实验原理

固相包被：微孔板预包被纯化DDC抗体作为固相载体。

反应步骤：依次加入样本或标准品、生物素化DDC抗体、HRP标记亲和素，经洗涤后以TMB显色。

显色机制：TMB在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸化后转为黄色，颜色深度与DDC浓度正相关。

检测：450 nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

核心组分：

预包被96孔酶标板

冻干标准品（2瓶，4,000 pg/ml，临用前稀释）

生物素化检测抗体、HRP标记亲和素

TMB底物、终止液

30×浓缩洗涤液（需稀释）

辅助材料：

样品稀释液、封板膜、说明书

标准品配制

初始浓度：4,000 pg/ml，以样品稀释液梯度稀释至62.5 pg/ml（系列浓度：2,000、1,000、500、250、125、62.5 pg/ml）。

操作注意：稀释需在EP管中完成，避免孔内直接稀释。

操作步骤

样本准备：血清/血浆需离心去除颗粒物，避免反复冻融。

加样与孵育：

加入标准品或样本（100 μL/孔），37℃孵育90分钟。

洗涤后加入生物素化抗体（100 μL/孔），37℃孵育60分钟。

显色与终止：

加入TMB底物（90 μL/孔），避光显色15-30分钟。

终止反应（50 μL/孔），30分钟内测定OD值。

关键参数

检测范围：62.5–4,000 pg/mL

灵敏度：低至0.144 mIU/mL（或等效pg/mL）

精密度：批内CV<10%，批间CV<15%

注意事项

储存条件：

未开封试剂盒：标准品、抗体保存于-20℃；TMB、终止液需4℃保存。

开封后：板条需密封防潮，避免反复冻融。

质控建议：每批次实验需包含标准曲线及空白对照。

废弃物处理：终止液含硫酸，需按化学废液规范处置。

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