人干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等样本中干细胞因子（SCF）的浓度。试剂盒包含预包被特异性抗体的微孔板、标准品、检测抗体、显色底物及终止液等核心组分，灵敏度高，特异性强，适用于科研及临床研究。

实验原理

固相包被：微孔板预包被人SCF特异性抗体，形成固相捕获体系。

抗原结合：样本中的SCF与固相抗体结合，洗涤后加入酶标检测抗体形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

信号放大与检测：加入底物TMB后，在辣根过氧化物酶（HRP）催化下显色，颜色深度与SCF浓度正相关。终止反应后，于450 nm波长测定吸光度值，通过标准曲线计算样本浓度。

适用范围

样本类型：血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等。

应用领域：免疫学研究、肿瘤微环境分析、干细胞功能评估等。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释SCF标准品。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1小时。

洗涤：去除未结合物质，重复3次。

酶标抗体孵育：加入HRP标记抗体，37℃反应30分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，终止液终止反应。

读数分析：酶标仪450 nm检测，绘制标准曲线并计算样本浓度。

注意事项

避免反复冻融样本，离心去除沉淀物。

实验需设阴阳性对照，确保结果可靠性。

显色时间需严格控制，避免过度反应导致本底升高。

需按说明书保存，短期内使用可置于4℃，长期保存建议-20℃。

质量控制

标准曲线：相关系数（R²）应≥0.99。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。

灵敏度：最低检测限通常为1-10 pg/mL（具体以批次说明书为准）。

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