人幽门螺旋杆菌IgG抗体(HP-IgG)ELISA试剂盒

概述

本试剂盒采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法，用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中幽门螺旋杆菌IgG抗体（HP-IgG）的浓度。适用于临床研究、实验室诊断及流行病学调查。

实验原理

固相包被：微孔板预包被纯化的抗人HP-IgG抗体。

抗原抗体反应：样本中的HP-IgG与固相抗体结合，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色与检测：加入底物TMB后，在HRP催化下产生蓝色产物，终止反应后转为黄色。通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），OD值与样本中HP-IgG浓度呈正相关，标准曲线计算浓度。

技术参数

检测范围：根据标准曲线动态范围。

样本类型：血清、血浆、组织匀浆等（避免溶血或反复冻融）。

种属特异性：人源样本，部分试剂盒可扩展至大鼠、小鼠、犬等。

灵敏度与特异性：采用高亲和力抗体，交叉反应率低。

试剂盒组成

预包被微孔板

HP-IgG标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

封板膜、说明书

操作步骤

样本准备：离心分离血清/血浆，避免脂血或污染。

加样与孵育：依次加入标准品、样本至微孔，37℃孵育30-60分钟。

洗涤：弃液后使用洗涤缓冲液洗板5次。

酶标抗体反应：加入HRP标记抗体，孵育后再次洗涤。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止反应后30分钟内检测OD值。

结果计算

以标准品OD值绘制标准曲线（四参数拟合或对数坐标），计算样本浓度。

临界值（Cut-off）建议：阴性对照均值+2×标准差（或按临床需求设定）。

注意事项

储存条件：2-8℃保存，避免冷冻；开封后尽快使用。

有效期：6个月（详见外包装标签）。

质量控制：建议每批次实验包含阴/阳性对照。

干扰因素：类风湿因子或高浓度异嗜性抗体可能导致假阳性。

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