人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中胰岛素样生长因子结合蛋白4（IGFBP-4）的含量，仅限体外研究使用。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被：微孔板预包被纯化的抗IGFBP-4抗体作为固相载体。

反应：依次加入待测样本或标准品、生物素化抗IGFBP-4抗体、HRP标记的亲和素，形成复合物。

显色：经洗涤后加入底物TMB，在过氧化物酶催化下显蓝色，酸性终止后转为黄色。颜色深度与样本中IGFBP-4浓度呈正相关。

检测：于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

酶联板：96孔（预包被抗体）。

标准品（冻干粉）：2瓶，每瓶复溶后浓度为400 ng/ml，需用样品稀释液梯度稀释为以下浓度：

400 ng/ml、200 ng/ml、100 ng/ml、50 ng/ml、25 ng/ml、12.5 ng/ml、6.25 ng/ml，稀释液作为0 ng/ml空白对照。

注：稀释需在临用前15分钟内完成，避免直接孔内稀释。

操作注意事项

标准品复溶需静置10分钟以上，充分混匀。

洗涤步骤需彻底，避免非特异性结合干扰。

显色时间需严格控制，终止后30分钟内完成检测。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

储存及有效期

未开封试剂盒保存于2–8°C，避免反复冻融标准品。

复溶后的标准品需分装冻存，避免反复冻融。

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