人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），通过特异性抗体捕获样本中的IL-10，结合辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，经显色反应后测定吸光度（OD值），定量分析IL-10浓度。

试剂盒组成

预包被板条：96孔板（可拆卸），包被抗人IL-10单克隆抗体。

标准品：冻干或液体形式，需按说明书复溶。

检测抗体：HRP标记的抗人IL-10抗体。

样本稀释液：用于稀释待测样本。

洗涤液：浓缩液，使用前需稀释。

底物A/B：TMB显色液。

终止液：2M硫酸溶液。

操作步骤

平衡与准备：

试剂盒室温平衡20分钟，剩余板条密封后4℃保存。

加样：

标准品孔：加入不同浓度标准品50μL。

样本孔：先加待测样本10μL，再加稀释液40μL。

空白孔：不加样。

孵育与检测：

每孔加入HRP检测抗体100μL，37℃孵育60分钟。

洗板5次，拍干后加入底物A/B各50μL，避光孵育15分钟。

终止与读数：

加入终止液50μL，15分钟内于450nm波长测定OD值。

样本要求

样本类型：血清、血浆（肝素抗凝）、细胞培养上清。

保存条件：-20℃短期保存，-80℃长期保存，避免反复冻融。

注意事项

实验前准备：

确保移液器校准，避免交叉污染。

洗涤时需充分拍干，减少背景干扰。

数据计算：

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，计算样本浓度。

质量控制：

建议设置复孔，CV值应≤15%。

若样本浓度超出标准曲线范围，需适当稀释后重测。

技术参数

检测范围：详见说明书标注。

灵敏度：≤1pg/mL（具体以实际批次为准）。

特异性：与人IL-10高度结合，无交叉反应。

运输与保存：2-8℃避光保存，有效期6个月。

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