人穿孔蛋白1(PRF1)ELISA试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、细胞上清液及其他生物样本中的穿孔蛋白1（PRF1）浓度。PRF1是一种由细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）和自然杀伤（NK）细胞分泌的关键效应蛋白，通过形成膜穿孔通道介导靶细胞凋亡，在抗肿瘤免疫、感染防御及自身免疫疾病研究中具有重要价值。

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：

包被：微孔板预包被PRF1特异性捕获抗体。

结合：样本中的PRF1与捕获抗体结合后，加入酶标检测抗体形成复合物。

显色：通过HRP催化底物TMB显色，颜色深浅与PRF1浓度正相关。

定量：450 nm波长测定OD值，标准曲线计算浓度。

性能参数

检测范围：0.78–50 ng/mL。

灵敏度：≤0.47 ng/mL。

特异性：与人PRF1高度结合，无交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均<10%。

样本要求

类型：血清（建议离心去除纤维蛋白）、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液、组织匀浆液。

保存：2–8℃可短期保存（≤24小时），长期需分装冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

试剂盒组成

预包被酶标板

PRF1标准品（梯度浓度）

检测抗体（HRP标记）

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

TMB显色底物

终止液（酸性溶液）

封板膜、说明书

操作步骤

标准品稀释：按说明书制备系列浓度标准品。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育1小时。

洗涤：洗板5次，去除未结合物质。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液后30分钟内测定OD值。

注意事项

科研用途：仅限实验室研究，不可用于临床诊断。

质量控制：建议每板设置复孔、空白孔及质控样本。

干扰因素：溶血、脂血或反复冻融样本可能影响结果。

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