人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被TIMP-2抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，通过底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，酸性终止液作用后呈黄色，颜色深度与样本中TIMP-2浓度呈正相关。最终在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算浓度。

样本要求

血清：使用无热原/内毒素试管采集，避免细胞刺激，3000rpm离心10分钟分离血清。

血浆：需EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000rpm离心30分钟取上清。

组织/尿液：需均质化或离心处理，具体方法参考实验方案。

试剂盒组成

规格：48孔或96孔板（液体盒装）。

主要组分：预包被微孔板、标准品、检测抗体、TMB底物、终止液、洗涤缓冲液等。

保存条件：2~8℃冷藏，使用前平衡至室温20分钟。

操作步骤

准备：取出所需板条，剩余密封后4℃保存。

加样：标准品孔加入梯度浓度标准品50μL，样本孔加入50μL待测样本。

孵育：37℃温育60分钟，洗板5次。

显色：每孔加入TMB底物50μL，避光反应15分钟。

终止：加入终止液50μL，15分钟内测定OD450nm。

注意事项

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

样本体积：建议50-100μL，避免反复冻融。

质量控制：建议复孔检测，标准曲线R²≥0.99。

技术参数

检测范围：依标准品梯度而定（详见说明书）。

灵敏度：通常≤1.0pg/mL。

反应时间：总时长约2.5小时（含孵育和显色）。

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