人基质金属蛋白酶8(MMP-8)ELISA试剂盒

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗人MMP-8抗体包被于微孔板，形成固相抗体。样本中的MMP-8与包被抗体结合后，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后加入底物TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。颜色深度与样本中MMP-8浓度呈正相关，通过450 nm波长测定吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或相关液体样本中基质金属蛋白酶8（MMP-8）的含量，适用于科学研究，不可用于临床诊断。

样本处理与保存

血清：无菌无热原试管采集血液，避免溶血，3000 rpm离心10分钟分离血清。

血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：3000 rpm离心10分钟去除颗粒物。

样本若需长期保存，建议分装后于-20℃或-80℃避冻存，避免反复冻融。

试剂盒组成

微孔板：预包被抗人MMP-8抗体（48孔或96孔配置）。

标准品：浓度2700 ng/L，0.5 mL/瓶（2-8℃保存）。

酶标试剂：HRP标记抗体（3 mL或6 mL）。

底物TMB、终止液、洗涤缓冲液。

封板膜、说明书及密封袋。

操作步骤

将标准品按梯度稀释，与待测样本分别加入微孔。

加入酶标试剂，37℃温育后洗涤。

加入TMB显色，避光反应后终止。

450 nm测OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

注意事项

试剂盒组分需按标签温度保存，避免反复冻融标准品。

实验需使用一次性吸头，避免交叉污染。

显色时间需严格控制，终止后应在10分钟内完成检测。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标拟合标准曲线，通过回归方程计算样本浓度（需乘以稀释倍数）。

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