大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒

概述

类型：酶联免疫吸附检测（ELISA）

检测目标：定量测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中的IL-1α浓度

适用范围：仅供科学研究使用

实验原理

采用双抗体夹心法（Two-step Sandwich ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被大鼠IL-1α单克隆抗体；

抗原结合：样本中IL-1α与包被抗体结合；

酶标抗体：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物；

显色反应：添加底物TMB，经HRP催化显蓝色→酸终止后转为黄色；

定量分析：450nm波长下测OD值，浓度与颜色深浅呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

标准配置（以96孔板为例）：

预包被微孔板

IL-1α标准品（不同浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色底物（A液+B液）

终止液（硫酸溶液）

浓缩洗涤缓冲液

封板膜、说明书

操作步骤概要

标准品/样本添加：向微孔中加入标准品或待测样本（如血清、血浆）；

温育：37℃孵育30-60分钟（依试剂盒要求），充分结合后彻底洗涤；

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，再次温育并洗涤；

显色：加入TMB底物溶液，避光反应15-30分钟；

终止反应：加入终止液，颜色由蓝转黄；

读数：30分钟内酶标仪450nm波长检测OD值。

注意事项

样本要求：

避免溶血、脂血或反复冻融血浆/血清样本；

新鲜样本需离心去除颗粒物。

关键操作要点：

不同批次试剂不可混用；

洗涤需彻底（≥5次），防止假阳性；

显色时间需严格控制。

安全提示：

终止液具强腐蚀性，需防护操作；

TMB为致癌物，避免皮肤接触。

数据分析：

需绘制标准曲线（5-7个浓度点），拟合R²≥0.99。

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