大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒

商品属性

用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞上清液等样本中的促肾上腺皮质激素（ACTH）含量，仅限科学研究使用，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将纯化的大鼠ACTH抗体包被于微孔板，形成固相抗体。依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后加入底物TMB显色，在过氧化物酶催化下产生颜色反应，颜色深度与样本中ACTH浓度呈正相关。最终用酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

48孔配置

酶标包被板：12孔×4条

标准品（6管）：浓度梯度为80、40、20、10、5、2.5 ng/L

20倍浓缩洗涤液：25 mL

样本稀释液：6 mL

显色剂A液/B液：各6 mL

终止液：6 mL

酶标试剂：6 mL

说明书、封板膜、密封袋

96孔配置

（组分数量按比例增加，具体以实际包装为准）

需自备器材

37℃恒温箱

450 nm滤光片酶标仪

精密移液器及一次性吸头

蒸馏水

离心机（3000 rpm）

样本处理

血清：采集血液后静置30分钟，3000 rpm离心10分钟，避免溶血。

血浆：使用EDTA/肝素抗凝管，3000 rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：离心去除颗粒物后直接检测或-20℃保存（避免反复冻融）。

操作步骤

平衡：试剂盒室温平衡30分钟。

配液：20倍洗涤液按1:19稀释为工作浓度。

加样：

标准品孔：加入梯度浓度标准品50 μL。

样本孔：加入待测样本50 μL。

空白孔：仅加样本稀释液。

孵育：37℃反应30分钟，洗涤5次。

显色：每孔加显色剂A/B各50 μL，37℃避光反应15分钟。

终止：加入终止液50 μL，15分钟内测定OD值。

计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本浓度。

注意事项

试剂使用前需摇匀，避免反复冻融。

不同批号试剂不可混用。

显色时间需严格控制，终止后应立即检测。

储存条件

未开封试剂盒2-8℃保存，有效期6个月；开封后酶标板需密封防潮。

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