大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA试剂盒

商品属性

规格：48T或96T（预包被酶标板）

保存温度：4℃

实验原理

采用双抗体一步夹心法（酶联免疫吸附试验，ELISA）：

微孔板预包被大鼠APLN捕获抗体。

依次加入样本、标准品、HRP标记的检测抗体（生物素化抗体），经温育后彻底洗涤。

加入底物TMB显色：在过氧化物酶催化下，TMB由无色→蓝色→酸终止后变为黄色。

颜色深度与样本中APLN浓度正相关。通过酶标仪测定450nm波长下的OD值，计算浓度。

样本处理要求

| 样本类型 | 处理步骤 | 保存条件 |

| 血清 | 全血室温静置2小时或4℃过夜 → 1000×g离心20分钟 → 取上清 | -20℃/-80℃（避免反复冻融） |

| 血浆 | EDTA/肝素抗凝 → 采集后30分钟内2-8℃下1000×g离心15分钟 → 取上清 | -20℃/-80℃（避免反复冻融） |

试剂盒组分（4℃保存）

| 组分名称 | 48T规格 | 96T规格 |

| 预包被酶标板 | 8×6条 | 8×12条 |

| APLN标准品 | 1支 | 1支 |

| 标准品/样品稀释液 | 10ml | 15ml |

| 生物素化检测抗体（100×） | 60μl | 120μl |

| 生物素化抗体稀释液 | 6ml | 10ml |

| TMB显色底物 | 10ml | 15ml |

检测步骤概要

加样：样本/标准品 + 检测抗体 → 37℃温育60分钟 → 洗板5次。

显色：加入TMB底物 → 37℃避光反应10分钟 → 加终止液。

读数：酶标仪450nm测定OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

重复冻融：样本避免反复冻融，以防蛋白降解。

洗涤：彻底清洗微孔板，减少背景干扰。

标准曲线：每次实验需同步测定标准品。

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