大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒

概述

规格：96T/48T（微孔板配置）

保存条件：2-8℃避光保存

保质期：6个月（以实际批次标签为准）

适用样本：大鼠血清、血浆、细胞培养上清液等

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗大鼠LIF抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下呈蓝色，酸化后转为黄色，其吸光度（OD值）与样本中LIF浓度正相关。通过标准曲线计算目标浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔或48孔（2-8℃保存）

标准品：冻干粉或液体（浓度范围示例：0-2000 pg/mL）

标准品稀释液：1.5 mL ×1瓶

酶标试剂：HRP标记抗体（3 mL/6 mL）

样品稀释液：3 mL/6 mL

显色剂A/B液：各3 mL/6 mL

终止液：1×10 mL

洗涤缓冲液（20×浓缩）：需按比例稀释

封板膜、说明书、密封袋

样本处理

血清：全血静置30分钟后离心（3000 rpm，10分钟），避免溶血。

血浆：EDTA/肝素抗凝，离心（3000 rpm，30分钟）取上清。

细胞上清：离心（3000 rpm，10分钟）去除颗粒物。

注：样本需分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至目标浓度。

加样：每孔加入样本或标准品50 μL，随后加入酶标试剂50 μL（空白孔除外）。

温育：37℃孵育60分钟，洗板5次。

显色：每孔加显色剂A/B各50 μL，避光反应15分钟。

终止：加入终止液50 μL，15分钟内测定OD450 nm。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线（推荐四参数拟合）。

样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数（若适用）。

注意事项

试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断。

避免交叉污染，不同批次试剂不可混用。

若样本浓度超出标准曲线范围，需调整稀释比例重新检测。

实验环境需符合生物安全要求，废弃物按规范处理。

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