大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、细胞上清液及其他相关液体样本中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的浓度，适用于科学研究用途。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。具体步骤如下：

包被抗体：将纯化的大鼠MIF单克隆抗体固定于微孔板，形成固相抗体。

抗原结合：加入待测样本或标准品，样本中的MIF与固相抗体结合。

酶标抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的MIF抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：洗涤后加入底物TMB，在HRP催化下生成蓝色产物，酸性终止液使其转为黄色。

检测分析：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与MIF浓度呈正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

MIF标准品

HRP标记抗体

TMB显色液

终止液

洗涤缓冲液（浓缩或即用型）

封板膜

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，避免反复冻融。

细胞上清液：离心去除细胞碎片，-20℃或-80℃保存。

操作注意事项

实验前需平衡所有组分至室温（18-25℃）。

标准品需梯度稀释，建议复孔检测以提高准确性。

洗涤步骤需彻底，避免交叉污染。

显色时间控制在15-30分钟内，避免过度反应。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合（或对数拟合）计算样本浓度。

技术参数

检测范围：通常为15.6-1000 pg/mL。

灵敏度：≤5 pg/mL。

特异性：不与大鼠其他细胞因子发生交叉反应。

储存条件

未开封试剂盒需保存于2-8℃，开封后按组分要求存放（部分试剂需-20℃避光保存）。

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