大鼠C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒

商品属性

检测原理

采用双抗体夹心法：

包被抗CRP抗体于微孔板，形成固相抗体。

加入样本（血清/血浆等），CRP与固相抗体结合。

加入酶标抗体（HRP标记），形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

洗涤后加底物（TMB）显色：蓝色→黄色（酸催化）。

450nm波长下测OD值，浓度与颜色深度正相关。

检测范围 & 样本类型

检测范围：80μg/L - 2400μg/L（线性区间）

适用样本：

血清、血浆（EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝）

细胞上清液、组织匀浆

试剂盒组成（以48孔配置为例）

| 组分 | 规格 | 保存条件 |

| 酶标包被板 | 48孔（12孔×4条） | 2-8℃ |

| 标准品（原液） | 4800μg/L × 0.5ml | 2-8℃ |

| 标准品稀释缓冲液 | 1.5ml | 2-8℃ |

| HRP标记检测抗体 | 3ml | 2-8℃ |

| 20×浓缩洗涤液 | 20ml | 室温 |

| 显色剂A液/B液 | 各3ml | 避光2-8℃ |

| 终止液 | 3ml | 2-8℃ |

| 样本稀释液 | 6ml | 2-8℃ |

样本处理要求

血清/血浆：离心后分离上清（3000转/10分钟），避免溶血。

组织匀浆：生理盐水捣碎后取上清。

保存条件：

分装后于 -20℃保存，避免反复冻融；

禁用含NaN3样本（抑制HRP活性）。

标准品稀释步骤（梯度制备）

| 标准品浓度 | 稀释方法（加标准品稀释液） |

| 2400μg/L | 原倍标准品150μl + 150μl |

| 1200μg/L | 2400μg/L溶液150μl + 150μl |

| 600μg/L | 1200μg/L溶液150μl + 150μl |

| 300μg/L | 600μg/L溶液150μl + 150μl |

| 150μg/L | 300μg/L溶液150μl + 150μl |

操作流程

加样：

空白孔、标准孔（各梯度50μl）、样本孔（50μl）。

温育：37℃避光孵育60分钟。

洗涤：20×洗涤液稀释后洗板5次，拍干。

加酶标抗体：每孔50μl（空白孔除外），37℃孵育30分钟。

显色：每孔加显色剂A/B液各50μl，避光反应15分钟。

终止：加终止液50μl，30分钟内测OD450nm。

关键注意事项

安全规范：

避免皮肤接触终止液/显色剂，操作时佩戴防护用具。

实验全程禁止饮食、吸烟。

操作要点：

试剂使用前平衡至室温，稀释后标准品不可保存。

未用板条需密封防潮，不同批次试剂禁止混用。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

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