大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞上清液中的髓过氧化物酶（MPO）含量，适用于科学研究，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）：

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠MPO抗体，形成固相抗体。

抗原结合：加入样本或标准品后，MPO与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成复合物。

显色反应：洗涤后加入底物TMB，在HRP催化下显蓝色，酸性终止液转化为黄色。

定量分析：450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算MPO浓度。

试剂盒组成

48孔/96孔配置：微孔板（预包被抗体）、标准品（80 uIU/mL）、空白对照、HRP标记抗体、TMB底物、终止液、封板膜、说明书。

保存条件：未开封试剂2–8℃保存，开封后按组分要求存放。

样本处理

血清/血浆：采集后3000 rpm离心（血清10分钟，血浆30分钟），避免溶血或反复冻融。

组织匀浆：生理盐水匀浆后3000 rpm离心10分钟取上清。

细胞上清：离心去除颗粒物后取上清。

操作步骤

标准品梯度稀释，样本按需预处理。

每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤后加入HRP标记抗体，孵育30分钟。

洗涤后加TMB显色15分钟，终止反应后立即检测OD值。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

严格控制孵育时间和温度，洗涤需彻底以减少背景干扰。

使用前平衡至室温，不同批次试剂不可混用。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

技术参数

灵敏度：通常≤1.0 uIU/mL。

检测范围：5–160 uIU/mL（具体参考标准品梯度）。

精密度：板内、板间变异系数均<10%。

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