大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒

商品属性

预期用途：本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清液或其他相关生物液体中的EPO含量，仅限研究使用，不适用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法检测EPO浓度。将纯化的抗EPO抗体包被于微孔板形成固相载体，依次加入待测样本或标准品、生物素化抗EPO抗体及HRP标记的亲和素。经洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色产物，酸性终止液作用后转为黄色。颜色深度与样本中EPO浓度呈正相关，通过450 nm波长测定吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

48孔配置：微孔板（包被抗体）、标准品（120 mU/mL）、生物素化抗体、HRP标记亲和素、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液、封板膜、密封袋、说明书。

96孔配置：组分同上，数量按比例增加。

标准品配制：临用前15分钟内将原液（120 mU/mL）用样品稀释液进行倍比稀释，浓度梯度为120、60、30、15、7.5、3.75、1.87 mU/mL，稀释液作为0 mU/mL空白对照。

操作步骤

加样：向微孔板中加入标准品或样本，每孔100 μL。

孵育：37℃孵育90分钟，洗涤去除未结合物。

加生物素化抗体：每孔加入100 μL，37℃孵育60分钟后洗涤。

加酶结合物：加入HRP标记亲和素，37℃避光孵育30分钟，洗涤。

显色：每孔加入TMB底物90 μL，避光反应15-30分钟。

终止与检测：加入50 μL终止液，立即于450 nm读取OD值。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

洗涤时需彻底清除孔内残留液体，避免交叉污染。

显色时间需严格控制，终止后10分钟内完成检测。

不同批次试剂组分不可混用。

保存条件：未开封试剂盒2-8℃保存，开封后按组分要求存放（部分需-20℃避光保存）。

有效期：详见包装标签。

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