大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA试剂盒

预期用途

用于定量测定大鼠组织匀浆、血清、血浆或其他相关生物液体中的胃蛋白酶(PP)含量（体外研究使用）。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被抗体：纯化的抗PP抗体预包被于微孔板；

抗原结合：样品/标准品中的PP与包被抗体结合；

标记抗体结合：加入生物素化抗PP抗体或HRP标记抗PP抗体，形成复合物；

显色反应：添加底物TMB，在HRP催化下显蓝色→酸终止转为黄色；

定量分析：颜色深度与PP浓度正相关，在450nm波长测OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

酶标板：96孔预包被板；

标准品：冻干粉2瓶，使用前需用样品稀释液重建至100 ng/ml，再梯度稀释为系列浓度（100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56 ng/ml，0 ng/ml为稀释液空白）；

生物素化抗体/HRP标记抗体；

洗涤缓冲液、显色底物TMB、终止液；

样品稀释液、酶结合物。

标准品配制关键：

溶解时静置10分钟，充分混匀；

梯度稀释需在EP管中进行，禁止板上直接稀释；

临用前15分钟内配制。

样品要求

样本类型：血清、血浆、组织匀浆液；

处理要求：避免反复冻融，澄清后分装保存（-20℃或-80℃）。

检测范围

1.56 ng/ml – 100 ng/ml（通过系列标准品梯度确定）。

质量控制要求

标准曲线需包含≥5点浓度（含零点）；

板内孔间变异系数（CV）应<15%；

复孔测定取均值。

注意事项

所有试剂使用前需平衡至室温（20-25℃）；

TMB显色时间需严格控制，避免过度反应；

不同批次试剂不可混用；

仅限科研用途，不可用于诊断或治疗。

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