大鼠干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒

概述

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液及其他生物液体样本中的干细胞因子（SCF）含量。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度、高特异性和稳定性。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠SCF抗体，形成固相抗体。

抗原结合：样本中的SCF与固相抗体结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下显蓝色，终止反应后转为黄色。颜色深度与样本中SCF浓度呈正相关。

检测：于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算SCF浓度。

适用样本

血清、血浆（需避免溶血或反复冻融）

组织匀浆（建议离心去除杂质）

细胞裂解液及培养上清液

试剂盒组成

预包被微孔板

SCF标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

封板膜、说明书

操作步骤

标准品稀释：按说明书配制系列浓度标准品。

加样：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液体，洗涤液洗板3次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止后30分钟内检测。

注意事项

避免反复冻融样本，分装保存于-20℃以下。

实验前平衡所有组分至室温（18-25℃）。

建议复孔检测，以阴性/阳性对照监控实验条件。

若本底过高，可使用BSA或血清封闭非特异性结合位点。

质量控制

标准曲线R²值应≥0.99。

批内变异系数（CV）＜10%，批间CV＜15%。

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