大鼠白细胞介素1(IL-1)ELISA试剂盒

商品属性

检测目的

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1β（IL-1β）的含量，适用于科研用途。

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被抗体：微孔板预包被纯化的大鼠IL-1β抗体，形成固相抗体。

抗原结合：样本中的IL-1β与固相抗体结合后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在HRP催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。颜色深度与样本中IL-1β浓度成正比。

定量分析：通过450 nm波长测定吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

96孔配置示例：

浓缩洗涤液（20 mL×1瓶）

酶标试剂（6 mL×1瓶）

酶标包被板（12孔×8条）

样品稀释液（6 mL×1瓶）

显色剂A液/B液（各6 mL×1瓶）

终止液（6 mL×1瓶）

标准品（96 ng/L，0.5 mL×1瓶）

标准品稀释液（1.5 mL×1瓶）

说明书、封板膜（2张）、密封袋（1个）

样本要求

采集与保存：

样本需尽快分离提取，避免反复冻融，短期保存于-20℃，长期保存建议-80℃。

避免使用含NaN3的样本（抑制HRP活性）。

预处理：

血浆：推荐EDTA或肝素抗凝，离心去除颗粒物。

血清：室温静置30分钟后离心，避免溶血。

操作步骤

标准品稀释：按梯度稀释（如96 ng/L→48 ng/L→24 ng/L→12 ng/L），具体稀释比例参照说明书图表。

加样与孵育：

每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤后加入酶标抗体，37℃孵育60分钟。

显色与终止：

加入TMB显色液，避光反应15-30分钟。

加入终止液后30分钟内测定OD值。

检测范围与灵敏度

检测范围：1 ng/L - 40 ng/L（具体范围可能因批次调整）。

灵敏度：通常≤0.5 ng/L。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

严格控制孵育时间和温度，洗涤时确保充分去除未结合物。

不同批次试剂组分不可混用。

有效期与储存

未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期12个月。

开封后：酶标板需密封防潮，其他组分按说明书要求保存。

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