小鼠甲胎蛋白（AFP）ELISA试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的甲胎蛋白（AFP），采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），具有高灵敏度（最低检出限59pg/ml）和强特异性，与小鼠瘦素、抵抗素等无交叉反应，板内及板间变异系数均小于10%。AFP是一种胎儿及肿瘤相关蛋白，分子量约66-72kDa，可作为癌症及发育异常的标志物。

试剂盒组成

96孔配置：12孔×8条微孔板（预包被AFP单抗）

48孔配置：12孔×4条微孔板

标准品：100ng/ml（需梯度稀释至0-40IU/ml）

浓缩清洗液：30ml（需1:30稀释至870ml蒸馏水）

生物素标记抗体、链霉亲和素-HRP、底物A/B

检测原理

包被抗体结合：样品中的AFP与预包被的单抗结合。

生物素标记抗体结合：加入生物素标记的二抗，形成复合物。

酶显色反应：通过链霉亲和素-HRP催化底物显色，颜色深度与AFP浓度正相关。

操作步骤

试剂准备

所有试剂需平衡至室温（18-25℃）。

稀释清洗液：30ml浓缩液加870ml蒸馏水。

标准品稀释（以40IU/ml为例）：

标准品F（40IU/ml）加0.6ml稀释液混匀，依次梯度稀释至A管（0IU/ml）、B管（2.5IU/ml）等。

加样与温育

分别加入标准品、质控品及待测样本至对应孔，避免交叉污染。

37℃温育后洗涤，依次加入生物素抗体、链霉亲和素-HRP及底物。

终止与检测

加入终止液后，450nm波长测定OD值，绘制标准曲线计算浓度。

注意事项

标准品稀释后需尽快使用，避免反复冻融。

不同批号试剂不可混用，避免底物接触金属离子。

实验废弃物需按生物危害规范处理。

储存条件

未开封试剂盒2-8℃保存，有效期12个月；开封后标准品及酶标板需-20℃保存。

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