大鼠巨噬细胞刺激蛋白(MSP)elisa试剂盒

一、核心检测参数

检测靶标：大鼠MSP（78kDa单链前体/65kDa活性形式）

检测原理：双表位夹心ELISA（特异性识别α/β异源二聚体）

动态范围：20-2000 pg/mL（5个数量级）

灵敏度：<6 pg/mL（可检测单个Kupffer细胞激活信号）

 样本兼容性：

肝脏Kupffer细胞培养上清（首选）

血清/血浆（肝素抗凝）

肝纤维化组织匀浆

腹膜巨噬细胞裂解液

二、关键技术突破

抗体对设计：

捕获抗体：抗α链（Clone 5A3）

检测抗体：抗β链（HRP标记）

特异性保障：

不识别HGFL/MST1

排除RON受体干扰（交叉反应<0.1%）

三、实验方案优化

巨噬细胞激活方案：

刺激条件 = LPS(100ng/mL) + IFN-γ(20ng/mL)

培养时间 = 48h（检测分泌高峰）

肝组织处理规范：

matlab

非实质细胞分离：

胶原酶IV消化 → 25% Percoll梯度离心

裂解缓冲液 = 含1% CHAPS的TBS

标准曲线配置：

7点梯度（2000-20 pg/mL）

推荐使用四参数logistic拟合

四、质量控制系统

参数  验收标准

批内精密度  CV≤5%

批间精密度  CV≤10%

回收率  92-108%

热稳定性  56℃ 30min活性保留>85%

五、核心应用领域

肝脏疾病研究：

肝纤维化分期标志物

肝再生能力评估

肿瘤免疫：

肿瘤相关巨噬细胞（TAM）极化研究

转移性肝癌微环境分析

炎症调控：

脓毒症巨噬细胞功能监测

自身免疫性肝炎机制

六、关键操作规范

特殊处理要求：

避免使用EDTA抗凝（影响蛋白构象）

组织样本需新鲜处理（<2h）

检测系统优化：

TMB显色时间 = 12±0.5min（避光精确计时）

终止后检测窗口 = <10min

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