大鼠结缔组织生长因子(CTGF)elisa试剂盒

                                             大鼠结缔组织生长因子(CTGF)elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆（如肝、肾、肺）或纤维化病灶中的 CTGF，一种CCN家族成员，通过整合TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin通路，调控成纤维细胞增殖、胶原沉积及器官纤维化进程。

检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠CTGF单抗（靶向N端TSP-1结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别C端CT结构域）结合 → 超敏HRP-TMB显色系统（450nm/630nm双波长校正）。

可选复合物检测：通过抗TGF-β1抗体共孵育检测CTGF/TGF-β1功能复合物。

 二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  0.2-50 ng/mL（6梯度点）

最低检测限  0.06 ng/mL（可检测早期纤维化）

样本兼容性  血清（推荐肝素抗凝）、肾小球分离液、肺组织裂解液（含1% SDS）

特异性验证  不与大鼠CYR61（CCN1）、NOV（CCN3）交叉

动态范围  线性相关系数R2＞0.99

三、典型应用场景

纤维化疾病研究

肝纤维化模型中CTGF与Ⅰ型胶原（Col1a1）表达的时空相关性

糖尿病并发症

糖尿病肾病肾小球系膜细胞CTGF过表达与蛋白尿进展的关系

创伤修复

皮肤伤口愈合过程中CTGF对肌成纤维细胞分化的调控

四、操作关键要点

样本处理

纤维化组织：需用含5M尿素的裂解液（4℃振荡2小时）充分提取基质结合型CTGF

血清样本：避免溶血（血红蛋白＞0.2g/dL需备注）

实验优化

高浓度样本需1:10稀释（使用含0.1% BSA的Tris-HCl缓冲液）

每板设置TGF-β1刺激阳性对照（10ng/mL处理成纤维细胞上清）

五、注意事项

干扰因素

高浓度透明质酸（＞1mg/mL）需用透明质酸酶预处理

数据解读

建议联合检测TGF-β1和α-SMA以评估纤维化通路激活状态

保存规范

未开封试剂盒4℃保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（冻融≤2次）

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