大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa试剂盒

                                             大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa试剂盒
一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、脑脊液、心脏组织匀浆或肿瘤微环境提取物中的 TIMP-4，一种选择性抑制MMP-2/MMP-9的糖蛋白，通过调控细胞外基质重塑参与心肌纤维化、神经退行性病变及肿瘤转移抑制。

 检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠TIMP-4单抗（靶向N端抑制结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别C端可变区）结合 → 链霉亲和素-HRP催化TMB显色（双波长450nm/570nm检测）。

可选复合物检测模块：通过抗MMP-2抗体共孵育检测TIMP-4/MMP-2复合物。

二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  0.05-10 ng/mL（覆盖生理至病理浓度）

最低检测限  0.015 ng/mL（超高灵敏度）

样本兼容性  血清（避免反复冻融）、心肌组织裂解液（含1% CHAPS）、脑脊液（需浓缩5倍）

特异性验证  不与大鼠TIMP-1/2/3交叉，但与MMP-2复合物有可控结合

动态范围  线性相关系数R2＞0.995

三、典型应用场景

心血管疾病研究

心肌梗死后TIMP-4动态变化与心室重构的负相关性分析

神经保护机制

脑缺血再灌注损伤中TIMP-4对血脑屏障完整性的保护作用

肿瘤微环境

乳腺癌转移灶中TIMP-4/MMP-9比值与患者预后的关联性

四、操作关键要点

样本处理

心肌组织：需液氮速冻后研磨，避免室温降解

脑脊液：采集后立即加入EDTA（1mM）抑制金属蛋白酶活性

实验优化

高浓度样本需1:10稀释（使用含0.1% Tween-20的TBS缓冲液）

每板设置MMP-2刺激阳性对照（验证复合物形成能力）

五、注意事项

干扰因素

高浓度肝素（＞2 IU/mL）会干扰TIMP-4与MMP结合

数据解读

建议联合检测MMP-2活性及胶原降解产物（如C-terminal telopeptide）

保存规范

未开封试剂盒4℃避光保存（有效期15个月），标准品-80℃分装（含40%甘油防冻）

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