大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)elisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、伤口渗出液、肺组织匀浆或纤维化组织中的 MMP-10，一种由巨噬细胞和上皮细胞分泌的蛋白水解酶，通过降解IV型胶原和纤维连接蛋白参与组织重塑、伤口修复及慢性炎症反应。

 检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠MMP-10单抗（靶向催化结构域）捕获目标酶 → 生物素标记二抗（识别铰链区）结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm/570nm双波长校正）。

可选活性检测模块：通过荧光底物（如DQ-gelatin）检测功能性MMP-10活性。

二、技术参数与验证

关键指标  技术说明

检测范围  0.2-50 ng/mL（6梯度点）

最低检测限  0.06 ng/mL（超高灵敏度）

样本兼容性  血清（避免反复冻融）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、皮肤溃疡渗出液（需离心过滤）

特异性验证  不与大鼠MMP-3、MMP-7交叉

抑制剂干扰测试  试剂盒含EDTA对照验证金属离子依赖性

三、典型应用场景

纤维化疾病研究

肺纤维化模型中MMP-10/TIMP-1比值与胶原沉积的相关性

慢性伤口愈合

糖尿病足溃疡渗出液中MMP-10高表达与愈合延迟的机制

肿瘤微环境

乳腺癌转移灶中MMP-10对血管基底膜的降解作用

四、操作关键要点

样本处理

伤口渗出液：需用0.22μm滤膜去除杂质，加入10mM EDTA抑制体外激活

组织样本：建议使用含0.1% Triton X-100的裂解液提取膜结合型MMP-10

实验优化

高浓度样本需1:5稀释（使用含0.1% BSA的TBS缓冲液）

每板设置LPS刺激阳性对照（巨噬细胞培养上清）

五、注意事项

干扰因素

高浓度血红蛋白（＞5mg/mL）需用肝素琼脂糖凝胶预处理

数据解读

建议联合检测TIMP-1和MMP-9以评估蛋白酶网络平衡

保存规范

未开封试剂盒4℃避光保存（有效期12个月），活性标准品需-80℃分装（含10%甘油）

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