大鼠白介素23(IL-23)elisa试剂盒

                                             大鼠白介素23(IL-23)elisa试剂盒
一、核心检测参数

检测靶标：大鼠IL-23（p19/p40异源二聚体）

IL-23 p19：Q9EQ15

IL-12/23 p40：P43425

检测原理：双表位夹心ELISA（特异性识别完整IL-23分子）

动态范围：10-800 pg/mL（6个数量级线性）

灵敏度：<3.5 pg/mL（超敏检测）

样本兼容性：

血清/血浆（肝素抗凝最佳）

脾细胞培养上清

肠系膜淋巴结匀浆

关节滑液

 二、关键技术突破

抗体对设计：

捕获抗体：抗p19亚基（表位：aa76-92）

检测抗体：抗p40亚基（生物素标记）

防交叉反应设计：

完全排除IL-12干扰（共享p40亚基）

与IL-27无交叉反应（验证数据可索要）

三、实验方案优化

样本处理规范：

细胞刺激方案：

刺激剂 = LPS(1μg/mL) + IFN-γ(20ng/mL) 培养时间 = 24h（37℃,5%CO）

- 组织处理：

匀浆比例 = 1:9(w/v) in PBS

离心条件 = 12000×g,4℃,15min

标准曲线配置：

8点梯度稀释（800-10 pg/mL）

推荐曲线拟合：四参数逻辑（4PL）模型

四、质量控制标准

参数  验收标准

批内精密度  CV≤7%

批间精密度  CV≤10%

回收率  92-107%

稀释线性  R2≥0.98

五、前沿应用场景

自身免疫疾病研究：

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型

胶原诱导性关节炎（CIA）Th17细胞监测

肠道免疫研究：

DSS结肠炎模型

肠道菌群-免疫轴调控

肿瘤免疫治疗：

IL-23/IL-17轴在肿瘤微环境中的作用

免疫检查点抑制剂联合治疗评估

六、关键操作要点

孵育体系优化：

捕获阶段：2-8℃过夜（提高灵敏度30%）

检测抗体：37℃ 45分钟（减少非特异结合）

洗涤关键参数：

wash_buffer = PBS + 0.05% Tween-20

wash_volume = 300μL × 5次

soak_time = 60秒/次

七、数据解读系统

病理阈值参考：

样本类型  生理水平  病理水平

血清  15-40pg/mL  >100pg/mL

脾细胞上清  50-200pg/mL  >500pg/mL

多因子联合分析：

必检组合：IL-23+IL-17A+IL-22

推荐比值：IL-23/IL-12p70

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