大鼠白介素12p40(IL-12p40)elisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆、组织匀浆（如脾脏、淋巴结）或细胞培养上清中的 IL-12p40，该亚基是IL-12（p70）和IL-23的共同组分，在Th1免疫应答和自身免疫疾病中起关键调控作用。

 检测原理

双抗体夹心ELISA：

预包被抗大鼠IL-12p40单抗捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗结合 → HRP-链霉亲和素-TMB显色系统（450nm主波长/630nm参比波长读数）。

二、试剂盒核心参数

关键指标  技术说明

检测范围  15.6-1000 pg/mL（7梯度点）

最低检测限  4.7 pg/mL（高灵敏度）

样本兼容性  血清（避免溶血）、脾脏匀浆（含蛋白酶抑制剂）、DC细胞培养上清

特异性验证  不与大鼠IL-12p70、IL-23交叉

批内/批间CV  ＜8%/＜12%

三、典型应用场景

感染免疫研究

结核分枝杆菌感染后IL-12p40对IFN-γ产生的促进作用

自身免疫疾病

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型中IL-12p40的动态变化

疫苗佐剂评估

铝佐剂或CpG ODN刺激后树突细胞IL-12p40的分泌水平

四、操作关键要点

样本处理

组织样本：建议用含0.1% Triton X-100的PBS匀浆，离心后取上清

细胞上清：需在刺激后24小时内收集，-80℃分装保存

实验优化

高浓度样本需1:5稀释（使用含1% BSA的PBS）

每板设置复孔（n≥2），CV值应＜10%

五、质控要求：

每板需包含：空白孔、标准曲线复孔（n=3）、内参质控品

六、注意事项

干扰因素

高浓度可溶性CD40可能非特异性结合，建议预吸附处理

数据解读

建议联合检测IL-12p70和IL-23以区分功能复合物

保存条件

未开封试剂盒4℃保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（冻融≤3次）

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