大鼠白介素11(IL-11)elisa试剂盒

                                             大鼠白介素11(IL-11)elisa试剂盒
1. 检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，特异性检测大鼠IL-1。微孔板预包被抗大鼠IL-11单克隆抗体，样本中的IL-11与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体，形成复合物后通过HRP-链霉亲和素系统催化TMB显色，450nm处吸光度与IL-11浓度成正比。

 2. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T  2-8℃（含干燥剂）  高亲和力单抗包被

IL-11标准品  0-500 pg/mL  -20℃  重组大鼠IL-11冻干粉

生物素-抗体  120 μL  -20℃（避光）  识别不同表位

HRP-链霉亲和素  120 μL  -20℃  高活性制剂

细胞裂解液  10 mL  -20℃  含蛋白酶抑制剂

TMB底物  10 mL  2-8℃（避光）  超敏配方

3. 核心参数

检测范围：15.6-500 pg/mL

灵敏度：4.7 pg/mL（最低检测限）

样本类型：

最佳：细胞培养上清（无血清培养基）

适用：血清、血浆（肝素抗凝）、组织匀浆

交叉反应性：

大鼠IL-11：100%

小鼠IL-11：<0.1%

人IL-11：<0.01%

精密度：

批内CV：<6%

批间CV：<9%

4. 样本处理规范

细胞培养上清：

收集后立即离心（1000×g，5分钟）

分装保存于-80℃（避免反复冻融）

组织处理：

取50mg组织加入450μL裂解液

超声破碎（冰浴，20kHz，3×10秒）

12000×g离心20分钟（4℃）

血清/血浆：

采集后30分钟内离心（3000×g，10分钟）

建议分装50μL/管冻存

5. 实验操作流程

标准品复溶：

用标准品稀释液配制0、15.6、31.2、62.5、125、250、500 pg/mL梯度

检测步骤：

加样100μL/孔（标准品/样本）

37℃孵育90分钟

洗板5次（自动洗板机，300μL/孔）

加生物素-抗体100μL/孔（37℃，60分钟）

加酶结合物100μL/孔（37℃，30分钟）

TMB显色（精确控制15±1分钟）

终止后立即检测（双波长读数）

6. 主要应用方向

骨髓造血研究：巨核细胞分化调控

纤维化疾病：肺/肝纤维化模型

肠道炎症：IBD中IL-11的促纤维化作用

肿瘤微环境：IL-11在转移中的作用

7. 关键注意事项

样本要求：

避免使用溶血、脂血样本

细胞刺激实验建议用无血清培养基

标准曲线：

必须包含零标准品（NSB孔）

推荐四参数logistic拟合

干扰因素：

血清样本可能需1:2稀释

高蛋白样本需额外离心

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