大鼠Thrombospondin-1elisa试剂盒

                                             大鼠Thrombospondin-1elisa试剂盒
一、试剂盒基本信息

检测目标：大鼠血小板反应蛋白-1（TSP-1）

生物学作用：TSP-1是一种多功能糖蛋白，参与血管生成、血小板聚集、细胞粘附和免疫调节等过程。

检测方法：双抗体夹心ELISA（酶联免疫吸附试验）

 样本类型：

血清（推荐）

血浆（EDTA/肝素抗凝）

组织匀浆（如血管、肿瘤组织）

细胞培养上清

灵敏度：通常 ≤0.1 ng/mL

检测范围：0.5–50 ng/mL

特异性：特异性识别大鼠TSP-1，与人、小鼠TSP-1交叉反应低（需确认说明书）。

二、实验原理

捕获抗体：微孔板预包被抗大鼠TSP-1单抗，结合样本中的TSP-。

检测抗体：加入生物素化或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

信号放大：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色）。

定量分析：450 nm测OD值，标准曲线计算TSP-1浓度。

三、试剂盒核心组分

组分  说明

预包被96孔板  抗大鼠TSP-1抗体固定化

TSP-1标准品  重组大鼠TSP-1（冻干粉，需复溶）

HRP标记检测抗体  生物素化或直接酶标

TMB显色液  避光保存，现用现配

终止液（2M HSO）  终止反应，稳定颜色

洗涤缓冲液（20×）  PBS含Tween-20，需稀释使用

四、操作流程（简化版）

标准品制备：梯度稀释（0、0.5、2、5、10、20、50 ng/mL）。

加样孵育：样本/标准品加入孔中，37℃孵育1–2小时。

洗涤：洗板3–5次（避免残留）。

二抗孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时。

显色：加TMB避光反应10–15分钟。

终止与检测：加终止液，15分钟内测OD450 nm。

五、典型应用场景

血管生成研究：

评估肿瘤、缺血性疾病模型中TSP-1的表达变化。

血小板功能研究：

检测血栓形成、动脉粥样硬化中TSP-1的作用。

纤维化疾病：

研究肝纤维化、肺纤维化中TSP-1的调控机制。

六、关键注意事项

样本处理：

血清/血浆采集后需尽快分离（2小时内离心，避免反复冻融）。

组织匀浆需充分裂解，离心取上清。

实验优化：

高浓度样本需稀释后检测，避免超出标准曲线范围。

数据可靠性：

建议复孔检测，CV值<10%。

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