大鼠TECK/CCL25elisa试剂盒

1. 检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，通过特异性识别大鼠TECK/CCL25（胸腺表达的趋化因子）的抗体对，实现高灵敏度检测。微孔板预包被抗CCL25抗体，样本中的CCL25与抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体，形成"抗体-抗原-抗体"复合物，再通过HRP-链霉亲和素系统催化TMB显色。

 2. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96孔  2-8℃

CCL25标准品  0-1000pg/mL  -20℃

生物素标记抗体  120μL  -20℃

HRP-链霉亲和素  120μL  -20℃

TMB底物  10mL  2-8℃（避光）

终止液  10mL  室温

20×洗涤缓冲液  50mL  室温

3. 技术参数

检测范围：15.6-1000pg/mL

灵敏度：<5pg/mL

样本类型：血清、血浆、胸腺组织匀浆、肠系膜淋巴结匀浆

检测时间：约4小时

批内变异：<7%

批间变异：<10%

回收率：85-115%

4. 样本处理

血清/血浆：采集后立即离心（1000×g，10min）

组织匀浆：

胸腺组织按1:9（w/v）加入PBS匀浆

4℃ 5000×g离心5min取上清

保存条件：

短期（1周）：2-8℃

长期：-80℃分装保存（避免反复冻融）

5. 实验步骤

标准品配制：梯度稀释（0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000pg/mL）

加样孵育：100μL/孔，37℃2小时

洗涤：自动洗板机清洗5次（300μL/孔）

加检测抗体：100μL/孔，37℃1小时

加酶结合物：100μL/孔，37℃30分钟

显色：TMB避光显色15-20分钟

终止检测：450nm主波长，630nm参比波长

6. 应用领域

胸腺发育研究：T细胞成熟与迁移机制

肠道免疫研究：肠黏膜淋巴细胞归巢

炎症性肠病：克罗恩病、溃疡性结肠炎模型

肿瘤免疫：CCL25在肿瘤微环境中的作用

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