大鼠Osteocactivinelisa试剂盒

一、核心检测信息

检测目标

特异性定量大鼠血清、血浆或骨组织提取液中的 Osteocalcin（骨钙蛋白），一种由成骨细胞分泌的γ-羧化谷氨酸蛋白（Gla蛋白），是骨形成和代谢的核心生物标志物。

 检测原理

竞争性ELISA（因Osteocalcin分子量较小）：

样本中的Osteocalcin与生物素标记的Osteocalcin竞争结合预包被抗体 → HRP-链霉亲和素催化TMB显色（OD值与浓度负相关）。

二、试剂盒核心参数

关键指标  技术说明

检测范围  0.5-50 ng/mL（覆盖生理及病理水平）

最低检测限  0.15 ng/mL（高灵敏度）

样本类型  血清（推荐空腹采集）、骨组织脱钙提取液（10% EDTA处理48小时）

特异性验证  不与大鼠BSP、OPN等骨基质蛋白交叉

批内/批间精密度  CV＜8%/CV＜12%

三、典型应用场景

骨代谢研究

骨质疏松或骨折愈合模型中成骨细胞活性的动态监测

内分泌调控

2型糖尿病中羧化不全型Osteocalcin（ucOC）与胰岛素敏感性的关联分析

药物开发

抗骨质疏松药物（如双膦酸盐）对骨形成的疗效评估

四、操作关键要点

样本处理

血清样本：需避光采集，4℃静置30分钟后离心（2000×g, 15min），避免反复冻融

骨组织样本：需先脱钙（10% EDTA, pH7.4）后匀浆，离心取上清

实验优化

竞争法需严格控制孵育时间（37℃ 45分钟±2分钟）

建议使用对数坐标拟合标准曲线

五、质控要求：

每板需包含：空白对照、零标准品（最大结合孔）、质控血清（已知浓度）

六、注意事项

干扰因素

维生素K拮抗剂（如华法林）会显著影响Osteocalcin的γ-羧化水平

数据解读

建议联合检测P1NP（骨形成标志物）和CTX-I（骨吸收标志物）

保存条件

试剂盒4℃保存，标准品-20℃分装（避免冻融＞3次）

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