大鼠Lipocalin-2elisa试剂盒

                                             大鼠Lipocalin-2elisa试剂盒
一、试剂盒核心信息

检测目标

Lipocalin-2（LCN2/NGAL）：一种分泌型糖蛋白，参与铁代谢、炎症反应及细胞凋亡调控，是急性肾损伤（AKI）、败血症和肿瘤微环境的敏感生物标志物。

种属特异性：适配大鼠样本（，与人LCN2同源性约60%，需验证交叉反应）。

适用样本类型

血清、血浆（推荐肝素抗凝）、尿液（离心去沉淀）、组织匀浆（肾脏、肝脏）、支气管肺泡灌洗液（BALF）。

性能参数

 检测范围：5–2000 pg/mL（如R&D Systems Cat.No.DLCN20，灵敏度2 pg/mL）。

检测时间：3.5小时（快速试剂盒可缩短至2小时）。

二、实验原理与关键技术要点

双抗体夹心法流程

步骤优化：

① 预包被抗大鼠LCN2单抗（克隆号：107014）→ ② 样本孵育（1.5小时，37℃）→ ③ 生物素化二抗（1小时）→ ④ HRP-链霉亲和素显色（TMB，450 nm）。

关键控制：

尿液样本需用PBS稀释（1:5–1:10）降低基质效应；

避免样本反复冻融（>3次导致蛋白聚集）。

数据校正建议

尿液样本需同步检测肌酐值（校正浓度：LCN2 pg/mg Cr）；

组织样本推荐BCA法标准化总蛋白浓度。

三、核心应用场景与科研价值

肾脏疾病研究

急性肾损伤（AKI）模型：LCN2在损伤后2小时即可在尿液中检出，早于血肌酐升高。

炎症与感染

败血症模型：评估LCN2作为炎症风暴预警标志物的敏感性。

肿瘤微环境

乳腺癌转移：探究LCN2通过铁剥夺抑制肿瘤细胞增殖的机制。

四、操作常见问题与解决方案

问题类型  可能原因  解决方案

标准曲线非线性  标准品稀释液pH异常（需7.4）  使用新鲜配制PBS（pH 7.2–7.6）

背景信号高  洗涤液残留或样本溶血  增加洗涤次数（≥6次），3000×g离心去溶血

尿检值波动大  采样时间或饮水状态影响  统一晨尿采集，禁水4小时

五、延伸研究方向

联检MMP-9（LCN2-MMP-9复合物）解析其在组织修复中的作用；

多组学分析（代谢组+蛋白组）探究LCN2-铁代谢轴机制。

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