大鼠IGFBP-4elisa试剂盒

一、试剂盒核心信息

检测目标

IGFBP-4：一种胰岛素样生长因子（IGF）结合蛋白，通过调控IGF-1/2的生物活性参与细胞增殖、分化及代谢平衡，与骨质疏松、心血管疾病和肿瘤进展相关。

种属特异性：适配大鼠样本。

 适用样本类型

血清、血浆（推荐EDTA抗凝）、组织匀浆（如骨骼、心脏）、细胞培养上清（如成骨细胞或血管平滑肌细胞）。

性能参数

检测范围：0.2–50 ng/mL（灵敏度0.08 ng/mL）。

检测时间：4.5小时（含孵育与显色步骤）。

二、实验原理与关键技术要点

双抗体夹心法流程

步骤优化：

① 预包被抗大鼠IGFBP-4单抗（克隆号：6H7）→ ② 样本孵育（2小时，室温）→ ③ 生物素化检测抗体（1小时）→ ④ Streptavidin-HRP显色（30分钟）。

关键控制：

骨骼样本需脱钙处理（避免钙离子干扰）；

避免样本反复冻融（>3次导致蛋白降解）。

数据校正建议

结合IGF-1/2水平分析游离与结合态比例；

高浓度样本需稀释验证（线性稀释回收率应达85–115%）。

三、核心应用场景与科研价值

骨骼代谢研究

骨质疏松模型：评估IGFBP-4对IGF-1促骨形成活性的抑制作用。

心血管疾病

心肌肥厚：探究IGFBP-4通过IGF-1R/PI3K通路调控心肌细胞肥大的机制。

肿瘤微环境

乳腺癌转移：分析IGFBP-4对肿瘤细胞侵袭性的影响。

四、操作常见问题与解决方案

问题类型  可能原因  解决方案

标准曲线R2<0.98  标准品溶解不充分或孔间污染  涡旋震荡标准品，更换无菌枪头操作

背景信号高  洗涤不彻底或封闭不充分  增加洗涤次数（≥5次），延长封闭时间

样本值异常低  样本中IGF-1过高竞争结合  预用酸乙醇处理样本释放结合态IGFBP-4

五、延伸研究方向

联检PAPP-A（IGFBP-4蛋白酶）解析其剪切调控机制；

多组学分析（如转录组+蛋白组）探究IGFBP-4在代谢综合征中的作用。

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