大鼠G-CSF/CSF3elisa试剂盒

                                             大鼠G-CSF/CSF3elisa试剂盒
一、试剂盒核心信息

检测目标

G-CSF/CSF3：一种造血生长因子，特异性促进中性粒细胞增殖、分化和存活，临床用于化疗后骨髓抑制的辅助治疗，与感染、自身免疫病及肿瘤微环境调控相关。

种属特异性：适配大鼠样本，需验证与小鼠G-CSF的交叉反应性）。

 适用样本类型

血清、血浆（EDTA抗凝）、骨髓液、组织匀浆（如脾脏）、细胞培养上清（如巨噬细胞或间充质干细胞）。

性能参数

检测范围：15–1000 pg/mL（灵敏度5 pg/mL）。

检测时间：4.5小时（含孵育与显色步骤）。

二、实验原理与关键技术要点

双抗体夹心法流程

步骤优化：

① 预包被抗大鼠G-CSF单抗（克隆号：104214）→ ② 样本孵育（2小时，室温）→ ③ 生物素化检测抗体（1小时）→ ④ Streptavidin-HRP显色（30分钟）。

关键控制：

骨髓样本需梯度离心（400×g，10分钟）去除红细胞碎片；

避免反复冻融（>3次导致蛋白降解）。

数据校正建议

结合血常规中性粒细胞计数验证功能性；

高浓度样本需稀释后复测（线性稀释回收率应达80–120%）。

三、核心应用场景与科研价值

血液系统研究

化疗骨髓抑制模型：评估外源性G-CSF促进中性粒细胞恢复的时效关系。

感染与免疫

脓毒症模型：分析内源性G-CSF水平与细菌清除率的关联。

肿瘤治疗

放疗联合G-CSF：探究其对肿瘤相关中性粒细胞极化的影响。

四、操作常见问题与解决方案

问题类型  可能原因  解决方案

标准曲线R2<0.98  标准品溶解不充分或孔间污染  涡旋震荡标准品，更换无菌枪头操作

背景信号高  洗涤不彻底或封闭不充分  增加洗涤次数（≥5次），延长封闭时间

样本值低于检测限  样本采集时间不当（峰值在刺激后6–12小时）  优化采样时间点

五、延伸研究方向

流式细胞术分选CD11b+Ly6G+中性粒细胞，验证G-CSF受体（G-CSFR）表达；

多因子联检（如GM-CSF、IL-6）解析造血调控网络。

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