大鼠Cathepsin Delisa试剂盒

一、试剂盒基本信息

检测目标

Cathepsin D：一种溶酶体天冬氨酸蛋白酶，参与蛋白质降解、细胞凋亡和肿瘤转移等过程，与阿尔茨海默病、乳腺癌等疾病相关。

种属特异性：适配大鼠样本（避免与小鼠或人源Cathepsin D交叉反应）。

适用样本

血清、血浆（建议EDTA抗凝）、组织匀浆（如脑、肝脏）、细胞裂解液或培养上清液。

检测范围与灵敏度

典型范围：0.1–50 ng/mL（如R&D Systems试剂盒灵敏度为0.05 ng/mL）。

 二、实验原理与步骤

核心原理

双抗体夹心法ELISA：

预包被抗大鼠Cathepsin D抗体捕获抗原 → 生物素化二抗结合 → HRP-链霉亲和素显色（450 nm定量）。

关键步骤

样本预处理（离心去除杂质） → 孵育（37℃，1–2小时） → 洗涤（避免非特异性结合） → 显色（TMB，避光） → 终止（硫酸） → 读值。

三、主要应用场景

神经退行性疾病

阿尔茨海默病模型：研究Cathepsin D在β-淀粉样蛋白降解中的作用。

肿瘤研究

乳腺癌转移机制：评估其通过降解细胞外基质促进侵袭的效应。

炎症与凋亡

缺血再灌注损伤：检测溶酶体膜通透性与Cathepsin D释放的关系。

四、样本处理

避免反复冻融（≤3次）；组织样本建议添加蛋白酶抑制剂。

干扰因素

高脂样本可能影响吸光度，建议超速离心去除脂质。

五、补充说明

数据解读：结合WB或免疫组化验证蛋白表达定位。

替代技术：荧光底物法（更高灵敏度）或活性检测试剂盒（检测酶活而非蛋白量）。

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