大鼠Antithrombin Ⅲelisa试剂盒

一、试剂盒核心信息

检测目标：大鼠抗凝血酶Ⅲ（AT III），一种由肝脏合成的丝氨酸蛋白酶抑制剂，调控凝血级联反应。

方法学：双抗体夹心ELISA，特异性结合AT III，通过酶标仪定量（检测波长450 nm）。

适用样本：血浆（推荐枸橼酸钠抗凝）、血清、组织匀浆（避免使用肝素抗凝样本，可能干扰结果）。

 二、关键组分与特点

1. 主要组分

预包被板：抗大鼠AT III单克隆抗体包被的96孔板。

标准品：重组大鼠AT III（浓度梯度通常为0.5–100 ng/mL）。

检测抗体：生物素标记的二抗+链霉亲和素-HRP系统。

显色底物：TMB（终止后黄色，检测波长450 nm）。

2. 性能特点

高灵敏度：最低检测限可达0.1 ng/mL，线性范围覆盖生理/病理浓度。

抗干扰性：不与大鼠其他凝血因子（如蛋白C/S）交叉反应。

稳定性：未开封试剂盒建议4℃保存（标准品-20℃冻存），有效期通常至2026年（具体以批次为准）。

三、实验流程与注意事项

1. 简化步骤

① 样本稀释（血浆建议1:10–1:100）→ ② 加样孵育（37℃ 1小时）→ ③ 洗涤→ ④ 加二抗孵育→ ⑤ 显色终止→ ⑥ 读数分析。

2. 关键注意事项

样本处理：血浆需离心（3000 rpm, 10分钟）去除血小板，避免反复冻融。

标准曲线：建议每个浓度做复孔，R2值需≥0.9。

干扰因素：溶血、高脂血症样本需额外验证。

四、应用场景

血栓与出血疾病研究：如DIC、肝衰竭模型中AT III消耗性降低。

药物评价：抗凝药物（如肝素）疗效监测（AT III是肝素辅助因子）。

基础机制：AT III在炎症、内皮功能障碍中的作用。

五、时效性提示

批次差异：2025年新批次试剂盒可能优化了孵育时间（缩短至30分钟），购买时需确认说明书版本。

替代技术：若需更高通量，可咨询厂商是否提供化学发光法（CLIA）版本。

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