重组COVID-19 RBD蛋白(RBD protein)elisa试剂盒

1. 概述

RBD蛋白是SARS-CoV-2刺突蛋白的关键功能域（分子量约25 kDa），介导病毒与ACE2受体的结合。本试剂盒采用高纯度重组RBD蛋白（基于WH01毒株），用于检测中和抗体、疫苗效价评估及抗体依赖性增强（ADE）效应研究，适用于科研与临床诊断。

 2. 检测原理

间接ELISA（中和抗体表位保留）：

包被抗原：His标签重组RBD（aa 319-541）预包被微孔板

抗体结合：血清样本中抗RBD IgG与抗原特异性结合

信号检测：HRP标记抗人IgG催化TMB显色（检测范围：0.1-100 μg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  高密度包被（1μg/孔）

RBD标准品  0.1-100 μg/mL  -80℃  纯度>95%（SEC-HPLC）

酶标二抗  1.2 mL  -20℃  抗人IgG（Fc特异性）

样本稀释液  50 mL  4℃  含0.5% BSA的PBST

阻断缓冲液  20 mL  室温  含5%脱脂奶粉

4. 样本要求

适用样本：

人/动物血清（56℃ 30min灭活）

疫苗免疫后血清（建议采集2-4周样本）

细胞培养上清（需10倍浓缩）

前处理方法：

血清：1:100起始稀释（可梯度稀释至1:102400）

高脂血：脂蛋白沉淀处理

结果判读：

阳性阈值：OD值≥阴性对照2.1倍

中和抗体预测：>15 μg/mL对应PRNT50≥1:40

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

0.1、1、10、50、100 μg/mL梯度

四参数拟合（R2≥0.99）

抗干扰设计：

添加10%正常鼠血清阻断异嗜性抗体

含RF样本需IgG吸附处理

质控体系：

WHO国际标准品（NIBSC 20/136）校准

批间CV<10%（n=20）

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