S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH)elisa试剂盒

1. 概述

SAH是甲基化反应的关键代谢产物（分子量384.4 Da），由S-腺苷甲硫氨酸（SAM）去甲基化生成。作为甲基化抑制因子，其浓度反映细胞甲基化状态。本试剂盒用于检测血清、组织匀浆及细胞裂解液中的SAH，适用于心血管疾病、神经退行性疾病及表观遗传学研究。

2. 检测原理

竞争性ELISA（SAH水解酶联法）：

包被抗原：SAH-BSA偶联物预包被微孔板

酶促反应：SAH水解酶将SAH转化为同型半胱氨酸和腺苷

信号检测：偶联的腺苷脱氨酶-过氧化物酶系统催化TMB显色（检测范围：0.1-100 μM）

 3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  特殊亲水处理

SAH标准品  0.1-100 μM  -80℃  ≥98%（HPLC验证）

酶反应混合液  2×1 mL  -20℃  含SAH水解酶/腺苷脱氨酶

组织裂解缓冲液  50 mL  4℃  含10 mM DTT

去蛋白试剂  12 mL  室温  6%高氯酸

4. 样本要求

适用样本：

血浆（EDTA抗凝，立即分离）

脑脊液（-80℃速冻）

肝脏组织（液氮速冻后匀浆）

培养细胞（PBS洗涤后裂解）

前处理方法：

液体样本：1:5稀释后去蛋白（回收率>90%）

组织样本：按1:9（w/v）比例裂解

生理参考值：

健康人血浆：0.15-0.30 μM

高同型半胱氨酸血症：>0.50 μM

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

0.1、0.5、1、5、10、50、100 μM梯度

四参数logistic拟合（R2≥0.99）

抗干扰措施：

添加1 mM EDTA防止氧化

含脂样本用氯仿:甲醇(2:1)萃取

质控要求：

低值质控（0.2 μM）

高值质控（10 μM）

批内CV<7%

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