牛早孕相关糖蛋白-9 单抗(PAG-9 Mab)elisa试剂盒

1. 概述

PAG-9是牛胎盘特异性表达的妊娠相关糖蛋白（分子量65-70 kDa），作为新型早期妊娠标志物，其检测窗口较PAG-2更早。本试剂盒采用高特异性单抗（克隆PG9-3C7），可在配种后18-25天实现准确妊娠诊断，适用于牧场精准繁殖管理。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（表位特异性识别）：

捕获抗体：预包埋抗PAG-9单抗（克隆PG9-3C7）

检测系统：生物素化抗PAG-9多抗（识别不同糖基化位点）

信号放大：链霉亲和素-AP催化pNPP显色（检测范围：0.1-20 ng/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  化学发光级包被

rPAG-9标准品  0.1-20 ng/mL  -80℃  糖基化修饰（CHO表达系统）

检测抗体  100 μL  -20℃  识别保守表位（aa 120-135）

乳汁处理液  20 mL  4℃  含酪蛋白水解酶

终止液  12 mL  室温  3M NaOH

4. 样本要求

适用样本：

血清（配种后18天即可检测）

乳汁（晨乳检测灵敏度提升40%）

血浆（肝素抗凝，避免反复冻融）

前处理：

乳汁：1:4稀释+离心（10000g×10min）

血清：避免溶血（血红蛋白<0.5 g/dL）

诊断阈值：

血清阳性：≥0.8 ng/mL（AUC=0.96）

乳汁阳性：≥0.5 ng/mL

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

0.1、0.5、1、2、5、10、20 ng/mL梯度

五参数拟合（R2≥0.998）

抗干扰设计：

添加10%驴血清阻断异嗜性抗体

高脂样本采用PEG沉淀预处理

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