重组牛早孕相关糖蛋白-8(PAG-9 protein)elisa试剂盒

一、试剂盒核心信息

1. 检测目标

PAG-9蛋白：由牛胎盘滋养层分泌的妊娠标志物，属于早孕相关糖蛋白家族（PAGs），在受孕后18–22天即可检出，特异性高于PAG-1等早期成员。

检测范围：

常规试剂盒：0.1–50 ng/mL（血清/血浆）；

高敏版本：0.01–10 ng/mL（适用于早期妊娠诊断）。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA：

微孔板预包抗PAG-9单克隆抗体（针对C端保守表位）；

样本中的PAG-9与抗体结合后，加入生物素标记的二抗；

链霉亲和素-HRP催化TMB显色（OD450 nm），信号强度与PAG-9浓度成正比。

3. 技术更新（2025年）

多PAG联检：同步检测PAG-9、PAG-2、PAG-12（评估胎盘功能）；

冻干稳定化：试剂室温保存期延长至12个月（如Bovigen产品）。

二、核心优势与典型应用

1. 高特异性与早期诊断能力

抗体经重组蛋白免疫筛选，交叉反应率：

与PAG-1<3%，与PAG-6<5%；

可区分妊娠与非妊娠状态（AUC>0.98），准确率≥95%。

2. 应用场景

畜牧业繁殖管理：

早期妊娠诊断（配种后20天检测，比B超提前10天）；

胚胎死亡或流产的早期预警（PAG-9骤降>50%）。

科研领域：

胎盘发育机制研究；

激素（如孕酮）与PAG分泌的关联分析。

三、操作流程与质控要点

1. 样本前处理

样本类型  处理方法  关键点

牛血清  离心（2000 ×g, 10 min）后直接检测  避免反复冻融（≤3次）

血浆（EDTA）  离心后去除纤维蛋白原  防止假阴性

乳清  脱脂（3000 ×g, 15 min）后稀释  调整pH至7.2–7.6

2. 检测流程

1. 加样（标准品/样本，100 μL/孔）→ 2. 25℃孵育90 min→

3. 洗板（6次）→ 4. 加检测抗体（50 μL/孔）→ 5. 25℃孵育60 min→

6. 洗板→ 7. 显色（TMB, 15 min）→ 8. 终止→读板（450 nm）。

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