维生素K1(VK1)elisa试剂盒

一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

维生素K1（叶绿醌，Phylloquinone）是脂溶性维生素，主要来源于绿叶蔬菜（如菠菜、羽衣甘蓝），作为γ-谷氨酰羧化酶的辅因子，参与凝血因子（II、VII、IX、X）活化和骨代谢调控。

2. 检测价值

凝血功能评估：VK1缺乏导致PT延长（国际标准化比值INR>1.5）。

新生儿筛查：预防维生素K缺乏性出血（VKDB），推荐脐血VK1≥0.15 ng/mL。

营养与慢性病：低VK1水平与骨质疏松、血管钙化风险相关。

 二、试剂盒关键技术参数

参数  技术细节

检测原理  竞争性ELISA（样本VK1与酶标VK1竞争结合抗体）

灵敏度  0.02–0.05 ng/mL（可检测生理/病理范围）

检测范围  0.1–20 ng/mL（血清）或 0.5–100 ng/g（组织）

样本类型  血清、血浆（EDTA）、肝脏组织、母乳

交叉反应  与VK2（MK-4）<5%，维生素E<0.1%

前处理要求  需有机溶剂（正己烷）提取，避免光降解

三、实验操作关键点

样本处理

血清/血浆：避光采集，离心（2000×g, 10分钟）后-80℃保存（冻融≤2次）。

组织样本：匀浆后正己烷萃取，氮吹浓缩复溶。

标准化流程

步骤1：样本与酶标VK1混合，加入预包被抗体板（37℃避光孵育1小时）。

步骤2：洗涤→HRP显色→450 nm检测（OD值与VK1浓度负相关）。

干扰控制

脂血影响：高脂样本需超速离心（100,000×g, 30分钟）去除乳糜微粒。

四、典型临床数据参考

人群  血清VK1浓度（ng/mL）  临床意义

健康成人  0.2–2.5  正常参考范围

新生儿（脐血）  ≥0.15  预防VKDB的临界值

长期抗生素治疗  <0.1  需补充VK1

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