酸性橙II(OII)elisa试剂盒

一、试剂盒原理与特性

检测原理

基于竞争性ELISA，样品中的酸性橙II与微孔板上包被的OII抗原竞争结合限量的特异性抗体，通过HRP酶标二抗催化显色（TMB底物），OD值与OII浓度成反比。

适用样本：辣椒制品、调味料、豆制品、卤味等（需溶解或稀释处理）。

检测性能

灵敏度：通常为0.01–0.5 μg/kg（远低于中国《GB 2760-2014》禁止添加的要求）。

特异性：对酸性橙II高特异性，偶见对柠檬黄、日落黄微弱交叉反应。

 二、核心应用场景

食品安全监管

检测食品中非法添加的酸性橙II（中国明确禁止在食品中使用）。

进出口合规

满足欧盟、美国等法规对合成色素的严格限制要求。

生产过程控制

监控食品企业原料或成品的非法色素添加风险。

三、试剂盒典型组成（96孔板规格）

组分  作用说明

预包被OII抗原板  固定化抗原用于竞争结合

酸性橙II标准品  0, 0.05, 0.2, 0.5, 1, 2 μg/mL梯度

酶标抗体  HRP标记的抗OII单抗/多抗

显色/终止系统  TMB底物+硫酸终止液

样本提取液  适用于油脂或高蛋白样本

四、操作流程关键点

样本前处理

液体样本（如调味汁）直接稀释；固体样本（如辣椒粉）需甲醇/水提取后离心。

孵育优化

25℃避光孵育15分钟（时间过长易导致背景升高）。

数据校准

建议使用**四参数拟合（4PL）**计算浓度，避免低浓度区线性偏差。

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五、注意事项

干扰因素：高色素或高盐样本可能抑制抗体结合，需稀释或透析处理。

保存条件：未开封试剂盒2–8℃保存，避免反复冻融标准品。