小鼠抵抗素(Resistin)elisa试剂盒

1. 概述

**抵抗素（Resistin）**是由脂肪细胞和免疫细胞分泌的激素（分子量12.5kDa），属于富含半胱氨酸的分泌型蛋白（RELMs）家族，通过TLR4和CAP1受体干扰胰岛素信号传导。作为连接肥胖与胰岛素抵抗的关键分子，其检测对代谢综合征、2型糖尿病和慢性炎症研究具有重要意义。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高特异性）：

捕获抗体：预包被抗小鼠Resistin单抗（克隆23-K）结合Resistin单体

检测抗体：生物素化抗小鼠Resistin单抗（克隆17-B）识别六聚体形式

信号放大：链霉亲和素-HRP催化超敏TMB显色

检测：OD450nm值与Resistin浓度正相关（检测范围：0.1-50 ng/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  特殊疏水处理

Resistin标准品  0.1-50 ng/mL  -20℃  重组小鼠Resistin（HPLC纯化）

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  识别C端结构域

SA-HRP  100 μL  2-8℃  RZ>3.0

稳定型TMB  10 mL  2-8℃（避光）  终止后2h稳定

脂肪裂解缓冲液  10 mL  -20℃  含DTT防多聚体形成

4. 样本要求

适用样本：

血清（空腹采血最佳）

附睾脂肪组织匀浆（1:9稀释）

巨噬细胞培养上清（LPS刺激）

动脉粥样硬化斑块提取液

特殊处理：

肥胖模型血清需1:10预稀释

避免使用还原剂（破坏二硫键结构）

稳定性：

4℃保存≤48h（需加蛋白酶抑制剂）

-80℃可保存6个月（分装冻存）

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5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL PBS复溶

7点梯度稀释（0.1、0.5、1、5、10、25、50 ng/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：37℃ 90min（振荡300rpm）

显色控制：室温精确10min