小鼠Mouse PD-L1(PD-L1)elisa试剂盒

                                             小鼠Mouse PD-L1(PD-L1)elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

PD-L1（Programmed Death-Ligand 1）是B7家族免疫检查点分子，在肿瘤细胞、抗原呈递细胞（APCs）及炎症组织中高表达，通过结合PD-1受体抑制T细胞功能，介导免疫逃逸和肿瘤微环境免疫抑制。

2. 检测价值

肿瘤免疫治疗：评估抗PD-1/PD-L1抗体（如Keytruda）的疗效预测标志物。

自身免疫病模型：PD-L1缺陷小鼠（如PD-L1 KO）易发生自身免疫性心肌炎。

感染免疫：慢性病毒感染（如LCMV）中PD-L1上调与T细胞耗竭相关。

二、试剂盒核心参数

参数  技术细节

检测原理  双抗体夹心ELISA（抗小鼠PD-L1单抗对）

灵敏度  1–3 pg/mL（高敏版本可达0.5 pg/mL）

检测范围  5–1000 pg/mL（覆盖血清/组织匀浆典型浓度）

样本类型  血清、血浆（EDTA）、肿瘤组织匀浆、细胞上清

交叉反应  不与PD-L2或B7-H3交叉（特异性>99%）

检测时间  3小时（含封闭步骤减少非特异性结合）

三、实验操作关键点

样本处理

肿瘤组织匀浆：建议使用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液（1:5 w/v匀浆），离心（12,000×g, 15分钟）取上清。

血清/血浆：避免反复冻融（≤3次），4℃短期保存≤24小时。

标准化流程

步骤1：样本与预包被抗体孵育（37℃, 90分钟）。

步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（450/630 nm双波长检测）。

数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，结果以pg/mL或pg/mg蛋白报告。

干扰控制

假阳性风险：样本中可溶性PD-L1（sPD-L1）需注明（可能与膜结合型区分检测）。

四、典型应用数据

小鼠模型  PD-L1浓度范围  生物学关联

MC38结肠癌模型  肿瘤组织: 200–1500 pg/mL  联合抗PD-1治疗响应预测

自身免疫性肝炎  血清: 50–300 pg/mL  疾病活动期显著升高

正常C57BL/6  血清: <20 pg/mL  基线表达水平

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