小鼠趋化因子CCL3(MIP-1α (CCL3))elisa试剂盒

1. 概述

**巨噬细胞炎症蛋白-1α（MIP-1α/CCL3）**是CC趋化因子家族成员（分子量8kDa），由活化T细胞、巨噬细胞等分泌，通过结合CCR1/CCR5受体招募免疫细胞。作为炎症和抗病毒反应的关键介质，其检测对感染免疫、自身免疫病和肿瘤微环境研究具有重要价值。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（超敏化学发光法）：

捕获抗体：预包被抗小鼠CCL3单抗（克隆39624）特异性结合CCL3

检测抗体：生物素化抗小鼠CCL3单抗（克隆68132）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-碱性磷酸酶（SA-ALP）催化CSPD发光

检测：发光强度（RLU）与CCL3浓度正相关（检测范围：1-500 pg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  特殊亲水处理

CCL3标准品  1-500 pg/mL  -20℃  NIBSC 96/548标定

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白

SA-ALP  100 μL  2-8℃  RZ>3.5

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  检测限0.3 pg/mL

细胞刺激缓冲液  5 mL  -20℃  含LPS/PHA

4. 样本要求

适用样本：

血清/血浆（肝素抗凝）

炎症组织匀浆（1:9 PBS）

巨噬细胞培养上清

病毒感染模型肺泡灌洗液

特殊处理：

避免使用EDTA（影响趋化因子稳定性）

含脂样本需超滤（TG>400 mg/dL）

稳定性：

4℃保存≤24h（需加蛋白酶抑制剂）

-80℃分装冻存≤6个月

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL去离子水复溶

7点梯度稀释（1、5、20、50、100、250、500 pg/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

化学发光读数：积分时间200ms/孔

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