小鼠趋化因子CCL8(MCP-2 (CCL8))elisa试剂盒

                                             小鼠趋化因子CCL8(MCP-2 (CCL8))elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

CCL8（MCP-2）属于CC趋化因子家族，由巨噬细胞、内皮细胞等分泌，通过结合CCR1/CCR2/CCR5受体招募单核细胞、T细胞及嗜酸性粒细胞，在Th2型免疫反应、过敏性疾病及肿瘤免疫逃逸中起关键作用。

2. 检测价值

过敏与哮喘模型：OVA致敏小鼠的肺组织中CCL8水平与嗜酸性粒细胞浸润正相关。

肿瘤微环境：乳腺癌（如4T1模型）中CCL8高表达与M2型巨噬细胞极化相关。

病毒感染：呼吸道合胞病毒（RSV）感染后CCL8促进Th2细胞募集。

二、试剂盒核心参数

参数  技术细节

检测原理  双抗体夹心ELISA（抗小鼠CCL8单抗对）

灵敏度  2–5 pg/mL（高敏版本可达1 pg/mL）

检测范围  10–2000 pg/mL（覆盖病理浓度）

样本类型  血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）、肿瘤组织匀浆

交叉反应  不与CCL7/MCP-3或CCL13/MCP-4交叉

检测时间  3.5小时（含封闭步骤减少背景信号）

三、实验操作关键点

样本处理

BALF样本：灌洗液需离心（500×g, 10分钟）去除细胞碎片，-80℃分装保存。

肿瘤组织：建议使用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液（1:5 w/v匀浆）。

标准化流程

步骤1：标准品/样本与预包被抗体孵育（室温, 2小时）。

步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（双波长450/570 nm检测）。

数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，低浓度样本（<20 pg/mL）建议复测。

干扰控制

高脂样本：脂肪组织需超速离心（100,000×g, 1小时）去除脂蛋白干扰。

四、典型模型数据参考

小鼠模型  CCL8浓度范围  关联表型

OVA诱导哮喘  BALF: 200–1500 pg/mL  嗜酸性粒细胞计数↑

4T1乳腺癌模型  肿瘤组织: 500–3000 pg/mL  CD206+ M2巨噬细胞浸润↑

RSV感染模型  肺组织: 100–800 pg/mL  IL-4/IL-5分泌水平↑

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