小鼠白介素9(IL-9)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠IL-9单抗（如大鼠IgG1），靶向IL-9的α螺旋结构域（检测范围5–1000 pg/mL）。

信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏化学发光底物（灵敏度1 pg/mL）。

抗干扰设计：含IL-4/IL-13阻断肽（交叉反应率＜0.3%），避免Th2细胞因子干扰。

动态范围优化

覆盖基础水平（健康小鼠血清＜5 pg/mL）至病理浓度（如哮喘模型BALF中＞200 pg/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗IL-9抗体固定化（批间差＜6%），可拆分使用

标准品  重组小鼠IL-9（0、5、20、100、400、1000 pg/mL，含0.1% HSA冻干保护剂）

适用样本  血清、血浆（EDTA抗凝）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、脾细胞培养上清

特殊添加剂  含0.01% ?防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、应用场景与科研价值

过敏与哮喘研究

OVA致敏模型：BALF中IL-9＞150 pg/mL提示肥大细胞活化与气道高反应性。

特应性皮炎：皮肤组织中IL-9与瘙痒症状正相关。

寄生虫感染

肠道线虫感染小鼠IL-9水平升高（＞100 pg/mL），反映Th9细胞应答。

肿瘤免疫调控

黑色素瘤模型中IL-9通过促进CD8? T细胞存活增强抗肿瘤免疫。

四、操作规范与质控要点

样本处理

BALF样本需离心（300×g，10分钟）去除细胞碎片，-80℃保存避免反复冻融。

细胞培养上清需去除死细胞（0.22 μm滤膜过滤）。

实验关键

温育条件：37℃避光45分钟，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜8%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测低至1 pg/mL的IL-9  无法区分IL-9单体与二聚体形式

特异性  与IL-4/IL-13交叉反应＜0.5%  高浓度样本需验证稀释线性（＞1000 pg/mL）

通量  适配自动化平台 组织样本需优化裂解缓冲液

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