小鼠白介素3(IL-3)elisa试剂盒

                                             小鼠白介素3(IL-3)elisa试剂盒
1. 概述

**白细胞介素3（IL-3）**是由活化T细胞分泌的造血生长因子（分子量15-17kDa），通过结合IL-3Rα/CD123受体促进髓系祖细胞增殖分化。作为多能集落刺激因子（Multi-CSF），其检测对造血异常、过敏性疾病和肿瘤免疫微环境研究具有重要意义。

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高灵敏度化学发光法）：

捕获抗体：预包被抗小鼠IL-3单抗（克隆MP2-8F8）特异性结合IL-3

检测抗体：生物素化抗小鼠IL-3单抗（克隆MP2-43D11）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-碱性磷酸酶（SA-ALP）催化CSPD发光

检测：发光强度（RLU）与IL-3浓度正相关（检测范围：2-500 pg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  低吸附表面处理

IL-3标准品  2-500 pg/mL  -20℃  WHO标准（NIBSC 89/548）溯源

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白

SA-ALP  100 μL  2-8℃  RZ>3.5

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

细胞刺激剂  5 mL  -20℃  含PMA/离子霉素

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐无溶血）

脾细胞培养上清（ConA刺激）

骨髓液（肝素抗凝）

过敏模型支气管灌洗液（BALF）

特殊处理：

避免使用EDTA抗凝（影响细胞因子释放）

高脂血样本需超滤（TG>300 mg/dL）

稳定性：

4℃保存≤24h（需加蛋白酶抑制剂）

-80℃分装冻存≤3个月

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL含1% BSA的PBS复溶

7点梯度稀释（2、5、20、50、100、250、500 pg/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

化学发光读数：积分时间100ms/孔

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