小鼠白介素21(IL-21)elisa试剂盒

一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

IL-21是由活化的CD4+ T细胞（尤其是滤泡辅助性T细胞，Tfh）和NKT细胞分泌的细胞因子，通过结合IL-21R受体调控B细胞分化、生发中心形成及细胞毒性T细胞（CTL）功能，是适应性免疫应答的核心调节分子。

2. 检测价值

自身免疫病模型：SLE（如MRL/lpr小鼠）中IL-21水平升高与自身抗体产生正相关。

肿瘤免疫治疗：评估CAR-T或PD-1抑制剂治疗后的免疫激活状态。

感染免疫：慢性病毒感染（如LCMV）模型中IL-21维持T细胞耗竭表型。

 二、试剂盒关键技术参数

参数  技术细节

检测原理  双抗体夹心ELISA（抗小鼠IL-21单抗对）

灵敏度  3–8 pg/mL（高敏版本可达1 pg/mL）

检测范围  10–2000 pg/mL（覆盖生理/病理浓度）

样本类型  血清、血浆（EDTA）、脾细胞培养上清、淋巴组织匀浆

交叉反应  不与IL-2/IL-15/IL-4交叉（特异性>99%）

检测时间  4小时（含延长孵育步骤提高灵敏度）

三、实验操作关键点

样本处理

细胞培养上清：刺激脾细胞（如抗CD3/CD28抗体）48小时后收集，离心（300×g, 5分钟）去除细胞。

组织匀浆：淋巴结或脾脏需用含0.1% Triton X-100的PBS匀浆，离心（10,000×g, 10分钟）取上清。

标准化流程

步骤1：样本与预包被抗体孵育（4℃过夜，提高低浓度检出率）。

步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（450 nm主波长，570 nm校正）。

数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，异常值需结合流式检测（如Tfh细胞比例）。

干扰控制

假阳性风险：样本中残留刺激剂（如PMA）需稀释至少1:10。

四、典型模型数据参考

小鼠模型  IL-21浓度范围  生物学关联

MRL/lpr（SLE模型）  血清: 200–800 pg/mL  抗dsDNA抗体水平↑

LCMV慢性感染  脾脏: 50–300 pg/mL  PD-1+CD8+ T细胞耗竭

黑色素瘤免疫治疗  肿瘤微环境: 100–500 pg/mL  CD8+ T细胞浸润↑

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