小鼠成纤维生长因子9(FGF-9)elisa试剂盒

                                             小鼠成纤维生长因子9(FGF-9)elisa试剂盒
1. 概述

成纤维细胞生长因子9（FGF-9）**是FGF家族成员（分子量22-30kDa），在中枢神经系统发育、骨骼形成和器官发生中起关键作用。通过结合FGFR3受体，调控细胞增殖和分化，其异常表达与颅缝早闭、侏儒症及肿瘤发生相关。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高亲和力单抗对）：

捕获抗体：预包被抗小鼠FGF-9单抗（克隆3F12）特异性结合FGF-9

检测抗体：生物素化抗小鼠FGF-9单抗（克隆5B8）识别不同表位

信号放大：链霉亲和素-HRP催化超敏化学发光反应

检测：发光强度（RLU）与FGF-9浓度正相关（检测范围：10-2000 pg/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  低吸附表面处理

FGF-9标准品  10-2000 pg/mL  -20℃  重组小鼠FGF-9（NIBSC标准溯源）

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无肝素干扰

SA-HRP  100 μL  2-8℃  RZ>3.2

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

肝素处理液  5 mL  -20℃  消除内源性肝素影响

4. 样本要求

适用样本：

血清/血浆（肝素抗凝需预处理）

脑脊液（需浓缩10倍）

软骨组织匀浆（含1% Triton X-100）

胚胎干细胞培养上清

特殊处理：

含肝素样本需添加处理液（1:10比例）

避免使用EDTA抗凝（螯合Ca2?影响FGF活性）

稳定性：

4℃保存≤24h（需加蛋白酶抑制剂）

-80℃可保存3个月（分装冻存）

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL含0.1% BSA的PBS复溶

7点梯度稀释（10、50、100、250、500、1000、2000 pg/mL）

关键步骤：

加样体积：50μL样本+50μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

化学发光读数：积分时间200ms/孔

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