小鼠成纤维细胞生长因子23(FGF-23)elisa试剂盒

                                             小鼠成纤维细胞生长因子23(FGF-23)elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

FGF-23是由骨细胞和成骨细胞分泌的激素样蛋白，通过调控肾脏磷重吸收和1,25(OH)?D?合成，在磷代谢平衡和**慢性肾病-矿物质骨异常（CKD-MBD）**中起核心作用。

 2. 检测价值

骨代谢疾病：低磷血症佝偻病模型（如Hyp小鼠）中FGF-23显著升高（>10倍正常值）。

肾脏研究：CKD模型血清FGF-23水平与肾小球滤过率（GFR）负相关。

药物开发：抗FGF-23抗体（如Burosumab）的疗效评估。

二、试剂盒关键技术参数

参数  技术细节

检测原理  双抗体夹心ELISA（抗小鼠FGF-23单抗对）

灵敏度  5–10 pg/mL（高敏版本可达2 pg/mL）

检测范围  15–1000 pg/mL（覆盖病理浓度）

样本类型  血清（首选）、血浆（EDTA）、骨组织匀浆

交叉反应  不与FGF-21/FGF-19交叉（同家族蛋白<0.1%）

样本处理  需添加蛋白酶抑制剂（防降解）

三、实验操作关键点

样本处理

血清/血浆：采集后立即冰上离心（2000×g, 10分钟），-80℃避光保存（冻融≤2次）。

骨组织匀浆：建议使用含EDTA的裂解液（抑制金属蛋白酶活性）。

标准化流程

步骤1：标准品/样本与预包被抗体孵育（4℃过夜，提高灵敏度）。

步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-AP→pNPP显色（405 nm检测）。

数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，骨代谢模型建议联合检测血磷/血钙。

干扰控制

假阴性风险：样本中磷酸盐浓度>5 mM需透析处理。

四、典型模型数据参考

小鼠模型  FGF-23浓度（血清）  病理关联

Hyp突变体  500–2000 pg/mL  X连锁低磷血症（XLH）

5/6肾切除CKD模型  300–1500 pg/mL  继发性甲旁亢

正常C57BL/6  50–200 pg/mL  基线生理水平

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